Cum se face un test de cariotip?
Ce este un test de cariotip??
Un cariotip este o fotografie a cromozomilor dintr-o celulă. Cariotipurile pot fi luate din celulele sangvine, din celulele pielii fetale (din lichidul amniotic sau din placentă) sau din celulele măduvei osoase.Ce condiții pot fi diagnosticate cu un test de cariotip?
Cariotipurile pot fi utilizate pentru a examina și a confirma anomalii cromozomiale, cum ar fi sindromul Down, și există mai multe tipuri diferite de anomalii care pot fi detectate.Una dintre acestea este trisomia în care există trei copii ale unuia dintre cromozomi, nu doi. În contrast, monozomiile apar atunci când există doar o copie (în loc de două). În plus față de trisomii și monozomii există deleții cromozomiale în care lipsește o parte a unui cromozom și translocații cromozomiale, în care o parte dintr-un cromozom este atașată la un alt cromozom (și viceversa în translocări echilibrate).
Exemple de trisomii includ:
- Sindromul Down (trisomia 21)
- Sindromul Edward (trisomia 18)
- Sindromul Patau (trisomia 13)
- Sindromul Klinefelter (XXY și alte variații) - Sindromul Klinefelter apare la 1 din 500 de bărbați nou-născuți și pare să crească în incidență
- Sindromul Triple X (XXX)
- Sindromul Turner (X0) sau monosomul X - Aproximativ 15% din pierderile de sarcină se datorează sindromului Turner, dar această trisomie este prezentă în numai 1 din 2000 de nașteri vii
- Sindromul Cri-du-Chat (cromozomul 5 lipsit)
- Sindromul Williams (lipsa cromozomului 7)
Mozaicismul este o afecțiune în care unele celule din organism au o anomalie cromozomială, în timp ce altele nu. De exemplu, sindromul mozaic Down sau trisomia mozaicului 9. Trisomia completă 9 nu este compatibilă cu viața, dar trisomia mozaicului 9 poate duce la nașterea viu.
(Un exemplu este în valoare de o mie de cuvinte. Aflați despre diferențele dintre sindromul translocație, trisomie și mozaic Down.)
Când este terminat un cariotip?
Există multe situații în care medicul dumneavoastră poate recomanda un cariotip. Acestea pot include:- Sugarii sau copiii care suferă de afecțiuni medicale care sugerează o anomalie cromozomială care nu a fost încă diagnosticată.
- Adulții care au simptome sugestive pentru o anomalie cromozomială (de exemplu, bărbații cu boală Klinefelter pot merge nediagnosticate până la pubertate sau la vârsta adultă.) Unele dintre tulburările trisomiei mozaicului pot, de asemenea, să devină nediagnosticate.
- Infertilitatea - Un cariotip genetic poate fi făcut pentru infertilitate. După cum sa menționat mai sus, unele anomalii cromozomiale pot să nu meargă nediagnosticate până la maturitate. O femeie cu sindrom Turner sau un bărbat cu una dintre variantele Klinefelter poate să nu fie conștientă de condiție până când se confruntă cu infertilitatea.
- Testarea prenatală - În unele cazuri, cum ar fi sindromul Down translocație, afecțiunea poate fi ereditară și părinții pot fi testați dacă un copil sa născut cu un sindrom Down. (Este important să rețineți că, de cele mai multe ori, sindromul Down nu este o tulburare ereditară, ci mai degrabă o mutație întâmplătoare.)
- Încălzire în viața de naștere - Un cariotip se face adesea ca parte a testelor după o naștere mortală.
- Pierderi recurente - un cariotip parental de avorturi recurente poate da indicii cu privire la motivele acestor pierderi recurente devastatoare. Se crede că anomaliile cromozomiale, cum ar fi trisomia 16, sunt cauza a cel puțin 50 la sută din avorturi.
- Leucemia - De asemenea, se poate efectua testarea cariotipului pentru a ajuta la diagnosticarea leucemiei, de exemplu, prin căutarea cromozomului Philadelphia găsit la unii oameni cu leucemie mielogenă cronică sau leucemie limfocitară acută.
Pași implicați într-un test de cariotip
Un test de cariotip poate suna ca un simplu test de sange, ceea ce face ca multi oameni sa se intrebe de ce dureaza atat de mult pentru a obtine rezultatele. Acest test este de fapt destul de complex după colectare. Să aruncăm o privire la acești pași pentru a înțelege ce se întâmplă în timpul așteptării testului.1. Colecția de probe
Primul pas în realizarea unui cariotip este de a colecta un eșantion. La nou-născuți, se colectează o probă de sânge conținând globule roșii, celule albe din sânge, ser și alte fluide. Se va face un cariotip pe celulele albe din sânge care se împart în mod activ (o stare cunoscută sub numele de mitoză). În timpul sarcinii, eșantionul poate fi fie lichid amniotic colectat în timpul unei amniocenteze, fie o bucată de placentă, colectată în timpul unui test de prelevare a probelor de coriene (CVS). Fluidul amniotic conține celule de piele fetale care sunt folosite pentru a genera un cariotip.2. Transportul către laborator
Cariotipurile se efectuează într-un laborator specific numit laborator de citogenetică - un laborator care studiază cromozomi. Nu toate spitalele au laboratoare citogenetice. Dacă spitalul sau instituția medicală nu are propriul laborator de citogenetică, proba de testare va fi trimisă la un laborator specializat în analiza cariotipului. Proba de testare este analizată de tehnologi citogenetici instruiți special, doctorat. citogeneticieni sau geneticieni medicali.3. Separarea celulelor
Pentru a analiza cromozomii, eșantionul trebuie să conțină celule care se împart în mod activ. În sânge, celulele albe din sânge se împart în mod activ. Cele mai multe celule fetale se împart în mod activ, de asemenea. Odată ce proba ajunge la laboratorul de citogenetică, celulele ne-divizate sunt separate de celulele care se separă folosind substanțe chimice speciale.4. Celule în creștere
Pentru a avea suficiente celule pentru analiză, celulele divizate sunt cultivate în mediu special sau într-o cultură celulară. Acest mediu conține substanțe chimice și hormoni care permit celulelor să se împartă și să se înmulțească. Acest proces de cultivare poate dura trei până la patru zile pentru celulele sanguine și până la o săptămână pentru celulele fetale.5. Sincronizarea celulelor
Cromozomii sunt un șir lung de ADN uman. Pentru a vedea cromozomii sub microscop, cromozomii trebuie să fie în cea mai compactă formă într-o fază de diviziune celulară (mitoză) cunoscută sub numele de metafază. Pentru a obține toate celulele în această etapă specifică de diviziune celulară, celulele sunt tratate cu o substanță chimică care oprește diviziunea celulară în punctul în care cromozomii sunt cei mai compacți.6. Eliberarea cromozomilor din celulele lor
Pentru a vedea aceste cromozomi compacți sub microscop, cromozomii trebuie să fie din celulele albe din sânge. Acest lucru se face prin tratarea celulelor albe din sânge cu o soluție specială care le face să explodeze. Acest lucru se face în timp ce celulele se află pe un diapozitiv microscopic. Resturile rămase din celulele albe din sânge sunt spălate, lăsând cromozomii blocați în diapozitiv.7. Colorarea cromozomilor
Cromozomii sunt natural incolori. Pentru a spune unui cromozom dintr-un altul, o colorant special numit colorant Giemsa este aplicat pe diapozitiv. Giemsa reglează petele de cromozomi care sunt bogate în baze adenină (A) și timină (T). Cand sunt colorati, cromozomii arata ca siruri de caractere cu benzi luminoase si intunecate. Fiecare cromozom conține un model specific de benzi luminoase și întunecate, care îi permite unui citogenetic să spună un cromozom de la altul. Fiecare bandă întunecată sau luminoasă cuprinde sute de gene diferite.8. Analiza
Odată ce cromozomii sunt colorați, diapozitivul este pus sub microscop pentru analiză. O imagine este apoi luată de cromozomi. Până la sfârșitul analizei, se va determina numărul total de cromozomi și cromozomii aranjați după mărime.9. Numărarea cromozomilor
Primul pas al analizei este numărarea cromozomilor. Majoritatea oamenilor au 46 de cromozomi. Persoanele cu sindrom Down au 47 de cromozomi. Este, de asemenea, posibil ca oamenii să aibă cromozomi lipsă, mai mult de un cromozom în plus sau o parte dintr-un cromozom care lipsește sau este duplicat. Privind doar la numărul de cromozomi, este posibil să se diagnosticheze diferite afecțiuni, inclusiv sindromul Down.10. Sortarea cromozomilor
După determinarea numărului de cromozomi, citogenezistul va începe sortarea cromozomilor. Pentru a sorta cromozomii, un citogenetic va compara lungimea cromozomului, plasarea centromerelor (zonele în care sunt îmbinate cele două cromatide) și locația și dimensiunile benzilor G. Perechile de cromozomi sunt numerotate de la cea mai mare (numărul 1) la cea mai mică (numărul 22). Există 22 de perechi de cromozomi, numiți autozomi, care se potrivesc exact. Există, de asemenea, cromozomii sexuali, femelele au două cromozomi X, în timp ce bărbații au un X și un Y.11. Privind structura
În plus față de numărul total de cromozomi și de cromozomii sexuari, citogenezistul va examina, de asemenea, structura cromozomilor specifici pentru a vă asigura că nu există nici un material lipsă sau suplimentar, precum și anomalii structurale precum translocațiile. O translocare apare când o parte a unui cromozom este atașată la un alt cromozom. În unele cazuri, două cromozomi sincronizați sunt înlocuiți (o translocare echilibrată) și alteori o piesă suplimentară este adăugată sau lipsește doar de la un singur cromozom.12. Rezultatul final
În final, cariotipul final prezintă numărul total de cromozomi, sexul și orice anomalii structurale cu cromozomi individuali. O imagine digitală a cromozomilor este generată cu toate cromozomii aranjate prin număr.Limitele testării cariotipului
Este important de menționat că, în timp ce testarea karyotype poate oferi o mulțime de informații despre cromozomi, acest test nu vă poate spune dacă există mutații genetice specifice, cum ar fi cele care provoacă fibroză chistică. Consilierul dvs. genetic vă poate ajuta să înțelegeți atât ce teste de cariotip vă pot spune și ce nu pot. Sunt necesare studii suplimentare pentru a evalua rolul posibil al mutațiilor genetice în boală sau avorturi spontane.De asemenea, este important de menționat că, uneori, testarea cariotipului poate să nu poată detecta unele anomalii cromozomiale, cum ar fi prezența mozaicului placentar.
